Was ist ein Fluoreszenzmikroskop?

Die Herstellung von Mikroskopen bedeutete einen wichtigen Fortschritt für die Wissenschaft und für die verschiedenen Studien, die später in der Branche durchgeführt wurden. Seit seiner Einführung wurden verschiedene Arten von Geräten gesehen, einschließlich des Fluoreszenzmikroskops. Um mehr über ihn zu erfahren, lesen Sie diesen Artikel weiter.

Es ist eine Variante des Ultraviolettlichtmikroskops, bei dem die beobachteten Objekte mit Wellenlängenstrahlen beleuchtet werden, sie zeigen ein Bild mit elektromagnetischer Strahlung, die von den Molekülen emittiert wird, die diese Strahlen absorbiert haben, und sie mit einem Licht mit längerer Wellenlänge wieder emittieren .

Das Bild wird dann mit einer sekundären Emission angezeigt, wobei geeignete Filter unter dem Kondensor und über dem Objektiv platziert werden. Diese Mikroskope werden verwendet, um Substanzen zu lokalisieren, die eine Autofluoreszenz aufweisen, wie Vitamin A und Fluorochrome.

Darüber hinaus hat die Fluoreszenz aufgrund der Moleküle von Fluorochrome und Fluorophore eine sehr kurze Lebensdauer. Erstere sind Moleküle, die Photonen mit einer längeren Wellenlänge absorbieren und emittieren können, und letztere sind ein Teil des Fluorochroms, das Fluoreszenz emittieren kann.

Dieses physikalische Phänomen wird verursacht, wenn es ein Elektron eines Atoms gibt, das in der Lage ist, die Energie einer bestimmten Wellenlänge zu absorbieren, es in einen Zustand der Erhebung zu bringen, um später in seinen Orbitalzustand zurückzukehren.

Ein Fluoreszenzmikroskop benötigt eine Lichtquelle, Filter und Objektive, diese müssen berücksichtigen, welche Art von Optik es benötigt und auch welche Art von optischem Design es benötigt, um Korrekturen bis unendlich, in endlicher Länge usw. vorzunehmen.< / p>

Epifluoreszenzmikroskop

Dies ist eine Variante des Fluoreszenzmikroskops, bei der die Fluoreszenz an einem herkömmlichen Mikroskop angebracht wird, indem es über das optische System oder die Vergrößerungslinsen eingesetzt wird und durch Lichtreflexion funktioniert.

Ein optisches Mikroskop muss einige wesentliche Elemente haben, um bei analytischen Arbeiten mit Fluoreszenz verwendet zu werden, sie müssen Objektive (Linsen) haben, die Licht gut durchlassen können, die meisten Linsen sind aus Fluorit hergestellt, in einigen Fällen haben sie eine höhere Kosten als herkömmliche Objektive.

Darüber hinaus haben sie aber auch eine bessere Auflösung bzw. Numerische Apertur, wobei dieser Punkt für die Diagnosestellung nicht zwingend notwendig ist. Aus diesem Grund ergänzt das Fluoreszenzzubehör das Beleuchtungssystem.

Komponenten des Epifluoreszenzmikroskops

Dieses Mikroskop muss eine Stromquelle haben, damit es funktioniert, einen Lampenhalter, der eine Quecksilberdampflampe enthält, die besser ist als eine Halogen- oder LED-Lampe, ein System, das dazu dient, Licht zu sammeln, und die spezifischen Fluoreszenzfilter.

Elektrische Stromversorgung: Sie muss über einen unabhängigen Transformator verfügen, der von der Lampe mit Strom versorgt werden kann, und über einen Betriebsstundenzähler verfügen, um den Betrieb zu überprüfen, da sie nur eine kurze Lebensdauer haben Emissionen sind nach 200 bis 300 Betriebsstunden erschöpft.

Lampenfassung: Es ist diejenige, die die Quecksilberdampflampe enthalten muss, diese wird in Räumen mit Belüftung verwendet, da sie viel Wärme abgibt, außerdem muss sie einen Wärmeschutz haben, um dies zu vermeiden brennt und ein Zentriersystem dreiachsige Lampe.

Quecksilberdampflampe: Es muss ein hoher Druck sein, es erzeugt einen Lichtbogen aus Glühelektrizität an den Polen, positiv und negativ, und dort konzentrieren sich die Quecksilbergasmoleküle, so dass die hohe Intensität entsteht weißes Licht, das auf die Probe im Mikroskop gelegt wird, wird erzeugt.

Dieses Licht, das er aussendet, wird durch das Lichtsammelsystem geleitet und wählt den Lichtstrahl so aus, dass er die Filter erreicht. Diese werden normalerweise in Blöcke oder flache Träger eingesetzt.

Die verwendeten Filter können Anregung, dichroitische Strahlteilung oder Emission sein. Die erste davon kann Wellenlängen auswählen, die bewirken, dass ein bestimmter Fluorophor in einer Probe vorhanden ist. Abgasfilter haben die Funktion der Qualitätskontrolle.

Die Funktion des dichroitischen Spiegels besteht darin, das Licht im Anregungsband zu reflektieren und es dann zum Emissionsband zu übertragen, wodurch die klassische Beleuchtung von Licht in Form von Epifluoreszenz funktioniert.

Wie funktionieren Fluoreszenzmikroskope?

Sie funktionieren durch das Gesetz von Stokes und Fluoreszenzfilter. In einem herkömmlichen Mikroskop ermöglicht die Beleuchtung die Betrachtung einer Probe durch die Übertragung von Licht, das durch sie hindurchgeht, wodurch das Bild im Objektiv erfasst und durch das Okular vergrößert werden kann, um es sichtbar zu machen.

In einem Fluoreszenzmikroskop kann die Probe durch die Reflexion des Lichts gesehen werden, das heißt, das Licht wird von der Quecksilberdampflampe zum System geführt, das das Licht sammelt, und von dort zum Vergrößerungsobjektiv oder zur Hilfslinse Licht, um die Probe zu fokussieren.

Sobald es dort angekommen ist, bewirkt es, dass es in einer breiteren Wellenlänge, aber mit geringerer Energie reflektiert wird. Das Gesetz von Stokes ist ein physikalisches Gesetz, das angibt, dass, wenn ein Objekt mit weißem Licht beleuchtet wird, die Farbe des Objekts stärker reflektiert wird.

Wenn die Probe eine grüne Farbe hat, absorbiert sie die Wellenlängen und reflektiert sie in der genannten Farbe, wenn das Objekt schwarz ist, absorbiert es alle Wellenlängen und wenn es weiß ist, neigt es dazu, alle Wellenlängen zu reflektieren. Wellen.

Sie werden in der biologischen und analytischen Mikroskopie aufgrund ihrer hohen Empfindlichkeit und ihrer Spezifität verwendet, die es dem Benutzer ermöglichen, einen einzelnen Molekültyp zu bestimmen, zu bestimmen, wie Ionen konzentriert sind und auch wie intra- und extrazelluläre Prozesse wie z Endozytose und Exozytose.

.

Hinterlasse einen Kommentar

Bitte beachten Sie, dass Kommentare vor der Veröffentlichung genehmigt werden müssen.